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偶氮萃取柱的操作問題解析
更新時(shí)間：2019-05-21
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偶氮萃取柱的操作問題解析
1.裝柱
柱子下的活塞避免使用潤(rùn)滑劑，以免被淋洗劑帶到產(chǎn)品中。干法和濕法裝柱區(qū)別較小，只要能把柱子裝實(shí)即可。裝柱前應(yīng)仔細(xì)觀察固相萃取柱是否開裂，避免影響分離效果，裝柱應(yīng)該要適度緊密（太緊密淋洗劑流速太慢，太疏松淋洗劑流速過快）、均勻（避免樣品從一側(cè)斜著流出），避免過柱時(shí)出現(xiàn)大量的氣泡。
2.加樣
用少量的溶劑溶樣品加樣，打開活塞，待溶劑層下降至石英砂面時(shí)，再加少量的低極性溶劑，然后再打開活塞，如此三次，一般石英變成白色。加入淋洗劑后不可立即加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有分開2-4cm，再加壓，這樣可以避免溶劑夾帶樣品快速下行。
3.樣品的收集
用硅膠作固定相過柱子的原理是一個(gè)吸附與解吸的平衡過程。如果樣品與硅膠的吸附較強(qiáng)，樣品解析較慢。這樣就會(huì)出現(xiàn)后面的點(diǎn)先出，而前面的點(diǎn)后出的現(xiàn)象，這時(shí)可以采用氧化鋁作固定相。另外，收集的試管大小要以樣品量而定，特別是小量樣品，如果用大試管，可能一根就收到了多個(gè)樣品，如果都用小試管，缺點(diǎn)是工作量太大。
4.后處理
偶氮萃取柱分離后，由于使用了大量的溶劑，其中的雜質(zhì)也會(huì)積累到所需組分中，必要時(shí)進(jìn)行重結(jié)晶。另外，過柱時(shí)有時(shí)會(huì)出現(xiàn)氣泡，這可能存在兩種原因：這與使用的溶劑類型有關(guān)，如果是易揮發(fā)的溶劑，如二氯甲烷等，在室溫稍高的情況下，很容易出現(xiàn)這種現(xiàn)象。因此，在室溫高的時(shí)候，應(yīng)該選擇沸點(diǎn)較高，揮發(fā)性相對(duì)小的溶劑。
偶氮萃取柱的清洗：
以5ml適當(dāng)極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱（常用的有純水,緩沖液,水/有機(jī)溶劑混合液）；
以5ml適當(dāng)非極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱；
以5ml去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱。
